紫外可見檢測器靈敏度高,噪音低,線性范圍寬,對流速和溫度均不敏感,可于制備色譜。由于靈敏高,因此既使是那些光吸收小、消光系數(shù)低的物質(zhì)也可用UV檢測器進(jìn)行微量分析。但要留意活動相中各種溶劑的紫外吸收截止波長。假如溶劑中含有吸光雜質(zhì),則會進(jìn)步背景噪音,降低靈敏度。此外,梯度洗脫時,還會產(chǎn)生漂移。
紫外可見檢測器檢測方式:
紫外可見檢測器檢測方式有直接紫外檢測、間接紫外檢測和柱后衍生化光度檢測等。
1、直接紫外檢測:使用的流動相為在檢測波長下無紫外吸收的溶劑,檢測器直接測定被測組分的紫外吸收強度。 多數(shù)情況下采用直接紫外檢測。
2、間接紫外檢測:使用具有紫外吸收的溶液作為流動相,間接檢測無紫外吸收的組分。 在離子色譜中使用較多,如以具有紫外吸收的鄰苯二甲酸氫鉀溶液作為陰離子分離的流動相,當(dāng)無紫外吸收的無機陰離子被洗脫到流動相中時,會使流動相的紫外吸收減小。
3、柱后衍生化光度檢測: 對于可與顯色劑反應(yīng)生成有色配合物的組分(過渡金屬離子和氨基酸等),可在被測組分從色譜柱中洗脫出來后與合適的顯色劑反應(yīng),在可見光區(qū)檢測生成的有色配合物。
使用紫外可見檢測器檢測時,為了得到高的靈敏度,常選擇被測組分能產(chǎn)生zui大吸收的波長作為檢測波長,但為了選擇性或其它目的也可適當(dāng)降低靈敏度而選擇吸收稍弱的波長。另外,應(yīng)盡可能選擇在檢測波長下沒有背景吸收的流動相。